Lihastautien erityisdiagnostiikka - Lihasbiopsian tutkimukset

Lähetteenä lihasbiopsiatutkimukseen käytetään lähettävän sairaalan omaa lähetelomaketta. Lisäksi uuden lihasbiopsianäytteen mukana toimitetaan lisälähete. Lähete, lisälähete ja näyte postitetaan osoitteella:

Pirkanmaan sairaanhoitopiiri
Fimlab Laboratoriot Oy
Patologia / Neuromuskulaaripatologia
Arvo Ylpön katu 4 (Finn-Medi 4, 2. krs)
33013 Fimlab

Kaikista lähetettävistä näytteistä on ilmoitettava laboratorioon etukäteen numeroon 03 311 74769.

Lihasbiopsian erikoistutkimukset

Jo tutkitun lihasbiopsian konsultaatiopyynnöt erikoisdiagnostisiin lisätutkimuksiin lähetetään osoitteeseen:

Tays, PNE / lihastautien tutkimuskeskus
Johanna Palmio
PL 2000
33521 Tampere

tai faksataan numeroon 03 311 64351. Faksattaessa selkeä saate on välttämätön.

Näyte sekä kopio konsultaatiopyynnöstä lähetetään osoitteella:

Fimlab Laboratoriot Oy
Genetiikan laboratorio / Lihastautien tutkimusyksikkö
Arvo Ylpön katu 4 (Finn-Medi 4, 4. krs)
33520 Tampere

Kaikista lähetettävistä näytteistä on ilmoitettava laboratorioon etukäteen numeroon 044 485 8449.

Lihasbiopsian erikoistutkimuksen konsultaatiopyyntö-lomake (pdf).

Lihasbiopsian tutkimuksia:

• Perustutkimukset
• Immunohistokemiallisia lisätutkimuksia
• Western blot
• EM

Perustutkimukset

Kaikista uusista lihasbiopsioista tehdään perustutkimussarja jääleikkeistä:

1. HE- (hematoksyliini-eosiini) -värjäys
   Hematoksyliini-eosiini on histopatologisten muutosten tulkintaan käytettävä yleisvärjäys. Hematoksyliini värjää tumien kromatiinin ja eosiini kudoksen yleisrakenteen.
2. Gomorin trikromivärjäys
   Trikromimenetelmiä käytetään lihaksen, sidekudoskomponenttien ja fibriinin erotteluun toisistaan.
3. NADH-tetrazolium reduktaasi -värjäys
   NADH-värjäyksellä tutkitaan mitokondrioiden NADH-dehydrogenaasin entsyymiaktiviteettia.
4. SDH-COX- (sukkinaattidehydrogenaasi-sytokromi-C-oksidaasi) -värjäys
   Mitokondrioiden toimintahäiriötä voidaan selvittää osoittamalla sukkinaattihydrogenaasin (SDH) ja sytokromi-c-oksidaasin (COX) aktiivisuus ja paikantuminen lihassyissä.
5. Myosiinien immunohistokemiallinen kaksoisvärjäys
   Menetelmä tunnistaa aikaisempaa ATPase-värjäystekniikkaa luotettavammin lihaksen eri syytyypit (hidas tyyppi I, nopeat tyypit IIA ja IIX) sekä myosiineja sekamuotoisesti ilmentävät ns. hybridisyyt.
6. Kehitysvaiheen myosiinien (MyHCn = neonatal ja MyHCd =developmental) immunohistokemialliset värjäykset
   Menetelmä tunnistaa syyt jotka erilaisten haittatekijöiden takia ilmentävät liikaa kehitysvaiheen myosiineja.
7. Antigeenejä presentoivan molekyylin HLA class 1 (major histocompatibility class 1) immunohistokemiallinen värjäys
   Menetelmä tunnistaa lihaskudoksen immuuniaktivaation seurauksena tapahtuvaa yo. molekyylien liiallista ilmentymistä lihassolujen kalvolla.

Immunohistokemian lisätutkimukset

Kudoksen immunohistokemialla identifioidaan haluttuja kudoksen proteiineja tai antigeenejä. Lihastautien immunohistokemiallisiin värjäyksiin kuuluvat muiden muassa:

• membraani-/kalvoproteiinit (myös alfa-dystroglykaani)
• tumakalvoproteiinit
• ionikanavat
• sytoplasmiset proteiinit
• sarkomeerin proteiinit
• metaboliset proteiinit
• muut

Tarkempaa tietoa tehtävistä immunohistokemiallisista tutkimuksista antaa lihastautien tutkimusyksikön laboratorio:

Fimlab Laboratoriot Oy
Genetiikan laboratorio, Lihastautien tutkimusyksikkö
Arvo Ylpön katu 4
PL 66
33013 Fimlab
Puhelin: 03 311 75328
Faksi: 03 311 77951

Western Blot-tutkimus

Lihastaudeissa lihasproteiinien määrässä voi tapahtua muutoksia. Western blot -menetelmällä kvantifioidaan lihasproteiineja.

Tutkittavat proteiinit western blot multiplex-menetelmällä (erikseen voidaan tarkennetusti tutkia muita proteiineja):

• Dystrofiini (kahdella eri vasta-aineella)
• Kaveoliini-3
• Dysferliini
• Kalpaiini-3 (kahdella eri vasta-aineella)
• Merosiini
• α-dystroglykaani

Elektronimikroskooppitutkimus

Elektronimikroskooppitutkimus (EM) tehdään silloin, kun on tarve päästä korkeaan resoluutioon tutkittaessa lihaskudoksen tai solun morfologisia poikkeavuuksia, erityisesti erilaisia body-kappale muutoksia. Lihasnäytteestä valmistetaan aina muoviblokki mutta itse EM-tutkimus tehdään vain tarvittaessa.